假俭草是一种重要的C4草本植物,也是起源于我国的最好的暖季型草坪草,有“中国草坪草”(Chinese lawn grass)的美誉。与其它常用暖季型草坪草(如狗牙根、结缕草)相比,假俭草具有耐瘠薄、养护水平低及病虫害少的典型优点,故其具有巨大的产业应用前景。在现有暖季型草坪草中,假俭草是典型的二倍体(2n=2x=18),具有相对稳定的遗传背景,是开展基础研究的优选草种。截止目前,已有有关假俭草组织培养和再生体系构建以及相关遗传转化的报道,然后纵观这些研究结果,所有建立的假俭草再生体系效率普遍偏低,进而严重制约了下游遗传转化工作的开展。观赏植物研究中心草业科学研究团队李建建博士等以代表性的假俭草品系 E092-1(绿茎系)和022(红茎系)为材料,利用其未成熟的幼穗为外植体,通过连续的愈伤诱导和继代、试管苗分化和生根培养,以期建立假俭草高效再生技术体系。研究发现适宜于愈伤诱导的最佳培养条件为MS培养基 + 4.0 mg/L 2,4-D + 0.2 mg/L BAP;适合于愈伤增殖继代的最佳培养条件为MS培养基 + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.1 mg/L BAP,并通过添加琼脂粉而增加渗透压;在MS培养基 + 2.0 mg/L KT + 0.1 mg/L NAA培养条件下,E092-1试管苗获得最大分化率100%,而E022在MS培养基 + 2.0 mg/L BAP + 0.1 mg/L NAA 培养条件下获得最大分化率87.8%;E092-1与E022在MS培养基 + 0.5mg/L NAA生根培养基上均实现最大生根率;所有试管苗经炼苗后移栽,成活率达到100%。据此,一套完整、高效的假俭草再生体系已建立。该高效再生体系愈伤诱导率高达 53.4% (E092-1)或 80.0%(E022),且胚性愈伤占总愈伤的百分数达到94.9%(E092-1)或95.7%(E022),远高于目前报道的胚性愈伤百分比5.2%(以种子作为外植体)或52.0%(以侧芽作为外植体),不仅克服了已报道体系中胚性愈伤发生率低和保存不稳定的问题,同时极大地提高了试管苗的再生率。为假俭草种质持续发掘与创新利用奠定了坚实基础。相关专利申请“一种以幼穗为外植体建立假俭草高效再生体系的方法”已于2017年3月在专利公报上公布。相关研究论文“High-efficiency plant regeneration from immature inflorescence derived callus cultures of two phenotypically distinct accessions of centipedegrass (Eremochloa ophiuroides) 已于2018年3月正式发表于农业与生物学SCI期刊International Journal of Agriculture and Biology (IJAB)。

      以上研究得到了江苏省科研条件与能力建设项目(No. BM2015019-1)和江苏省自然科学基金项目(No. BK20171327)的资助。

 

     专利链接:http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=patent&id=CN201610926203.2

     论文链接:http://www.fspublishers.org/published_papers/9995_..pdf